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　　?化妝品細菌回復(fù)突變試驗的主要目的是檢測化學(xué)物質(zhì)是否具有致突變性，即檢測其是否會引起基因突變的能力?。這種試驗通常被稱為Ames試驗，是由美國科學(xué)家布魯斯·艾姆斯在1970年代開發(fā)的?。

　　細菌回復(fù)突變試驗利用特定類型的突變菌株，這些菌株攜帶有特定的基因突變，導(dǎo)致它們不能在沒有外源性營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基中生長。通過將這些菌株暴露于測試化合物中，如果該化合物具有致突變性，它會誘導(dǎo)這些突變菌株產(chǎn)生基因回復(fù)突變，使其重新獲得在無外源性營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基上生長的能力。因此，通過檢測這些回復(fù)突變菌株的生長情況，可以評估化合物的致突變性?。

　　化妝品細菌回復(fù)突變試驗方法步驟

　　1.?菌株準備?

　　選取具有已知突變的鼠傷寒沙門氏菌或大腸桿菌菌株，這些菌株通常是組氨酸或色氨酸營養(yǎng)缺陷型?。

　　2.?培養(yǎng)基準備?

　　準備缺乏特定氨基酸（如組氨酸或色氨酸）的選擇性瓊脂培養(yǎng)基?。

　　3.?化合物處理?

　　制備待測化合物的不同濃度溶液，通常還包括陽性對照（已知致突變物）和陰性對照（不含致突變物）?。

　　4.?預(yù)實驗?

　　對未知或懷疑對試驗菌株有抑制作用的試驗樣品進行預(yù)實驗，評估樣品是否有細胞毒性。如有抑制作用，則需對試驗樣品進行梯度稀釋，直至找到無細胞毒性的濃度范圍?。

　　5.?主試驗?

　　?菌株培養(yǎng)?：將冷凍保存的菌株培養(yǎng)物接種于營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，培養(yǎng)至對數(shù)增長期?。

　　?頂層培養(yǎng)基準備?：融化頂層培養(yǎng)基，并將其分裝于無菌小試管中?。

　　?混合與培養(yǎng)?：在保溫的頂層培養(yǎng)基中加入試驗菌株的新鮮菌液、試驗樣品浸提液（或陰性、陽性對照液）以及代謝活化劑（如S9混合物），混勻后迅速傾倒在底層培養(yǎng)基上，靜置凝固?。

　　?培養(yǎng)與觀察?：將培養(yǎng)皿放入培養(yǎng)箱中，在適宜溫度（通常是37℃）下培養(yǎng)48-72小時，觀察并記錄菌落生長情況?。

　　6.?結(jié)果判讀?

　　?陽性結(jié)果?：如果暴露于待測化合物的菌株產(chǎn)生的反向突變菌落數(shù)量顯著多于陰性對照，則該化合物被認為是致突變的?。

　　?陰性結(jié)果?：如果沒有顯著增加的反向突變菌落，化合物被認為是非致突變的?。